禽流感诊断监测方法很多,各种方法都有各自的应用范围,有各自的优点和局限性。现将各种方法作一总结,在诊断监测工作中,应根据具体工作需要采用合适的方法。禽流感各种检测方法的比较见下表。
检测方法
检测对象
依据标准
适用性与局限性
所用试剂
试剂来源
琼脂扩散(AGID)试验*
A型AIV抗体
GB/T
方法简单,敏感性低
型抗原、抗血清
哈尔滨兽医研究所
血凝(HA)及血凝抑制(HI)试验*
血凝素亚型抗原、抗体
GB/T
鉴定HA亚型,直观反映抗体水平,有明显交叉反应
血凝素抗原、抗体
哈尔滨兽医研究所
间接ELISA*
A型AIV抗体
NY/T—
敏感性高,适合批量测定
ELISA试剂盒
IDEXX元亨公司
免疫胶体金试纸
A型AIV抗原
适合现场快速诊断
胶体金试纸条
世纪元亨公司
免疫荧光(IF)试验
组织、细胞病毒抗原
诊断速度较快,受主观经验影响大,不易掌握
抗AIV荧光抗体
国内无试剂
免疫酶渗滤法
A型AIV抗原
诊断速度较快,步骤比胶体金试纸多,适合小样本量测定
免疫酶试剂盒
国内无试剂
RT-PCR*
病毒基因
NY/T—
速度较快,可以鉴定亚型。
RT-PCR试剂盒
农业部兽医诊断中心
荧光RT-PCR
病毒基因
GB/T.1-(通用);GB/T.2-(H5)GB/T.3-(H7)GB/T.4-(H9)
敏感度比常规RT-PCR高。但成本高,仪器昂贵。
荧光RT-PCR试剂盒
北京出入境检验检疫局
NASBA
病毒基因
GB/T-(通用)GB/T-(H5)
高敏感性,操作烦琐,易产生假阳性
NASBA试剂盒
上海出入境检验检疫局
病毒分离*
病毒
GB/T
可最终确诊,周期长
鸡胚
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